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ELISA试剂盒实验应了解的规则
文章来源:江苏菲亚生物科技有限公司   添加时间:2020/5/27 14:37:12 点击率:1498

ELISA试剂盒实验应了解的规则:

a)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,每个标准品和空白孔建议做复孔,每个样品根据自己的数量来定,标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。

b)将所有试剂盒充分混匀,不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

c)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干,重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

d)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内,立即加入50ul的生物素标记的抗体,盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

e)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

f)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

g)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟,避免光照。

h)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干,重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

i)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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